Joris van Dongen

351 Nederlandse samenvatting NEDERLANDSE SAMENVATTING In hoofdstuk 2 is een systematische review uitgevoerd welke alle beschikbare commerciële en intra-operatieve procedures analyseert om de stromale vasculaire fractie (SVF) te isoleren. Pubmed, EMBASE, (OvidSP) en het Cochrane centraal register van gecontroleerde studies zijn hiervoor doorzocht tot september 2016. Studies die zich bezighielden met de validatie van isolatieprocedures van SVF op basis van aantal cellen, vitaliteit van cellen met kernen, compositie van SVF, duur, kosten en karakteristieken van procedures zijn geïncludeerd. Geen enkele van deze geïncludeerde studies kon aangewezen worden als geprefereerde methode op basis van aantal cellen, vitaliteit van cellen met kernen of compositie van SVF door een grote mate van heterogeniteit in validatiemethodes. Echter, er bestaan grote verschillen in duur en kosten tussen enzymatische en mechanische isolatieprocedures. In zijn algemeenheid kosten enzymatische procedures meer tijd en zijn duurder door het gebruik van niet- autoloog materiaal zoals enzymen of dierlijk materiaal en disposable componenten. Mechanische isolatieprocedures zijn minder tijdrovend en minder duur omdat er alleen gebruik wordt gemaakt van scheuringskrachten als dissociatiemethode. Verder resulteren mechanische isolatieprocedures in een tissue achtige SVF (tSVF) met een intacte intercellulaire verbindingen zoals extracellulaire matrix, terwijl enzymatische isolatieprocedures resulteren in een suspensie van enkele cellen (cellulaire SVF (cSVF)). Dit is de reden dat we voor een mechanische isolatieprocedure om tSVF te isoleren hebben gekozen in onze prospectieve gerandomiseerde klinische studies. In hoofdstuk 3 is een mechanische isolatieprocedure, de zogenaamde Fractionation of Adipose Tissue (FAT) procedure ontwikkeld en gevalideerd om tSVF te isoleren van geoogst vetweefsel. De FAT procedure bestaat uit drie opeenvolgende stappen: centrifugeren gevolgd door fractioneren en aanvullend wederom centrifugeren. De geproduceerde tSVF is gevalideerd op basis van vitaliteit, histologische compositie en de aanwezigheid van vet mesenchymale stromale cellen (ASCs). ASCs zijn gekarakteriseerd op basis van functie, fenotype en de mogelijkheid om kolonies te vormen. Alle protocollen van de hiervoor genoemde experimenten om de FAT procedure uit te voeren en te valideren zijn opgenomen in een overzicht in hoofdstuk 6 . De FAT procedure was in staat om tSVF tienvoudig te concentreren en bestond voornamelijk uit extracellulaire matrix en de vaatvoorziening door middel van het afbreken van vetcellen. De vitaliteit van tSVF was nagenoeg 100%. ASCs geïsoleerd uit tSVF waren niet aangedaan door de FAT procedure en lieten in vergelijking met onbewerkte ASCs dezelfde differentiatie capaciteit in meerdere cellijnen, CD expressie